【佳學(xué)基因檢測(cè)】結(jié)節(jié)性硬化癥基因突變做什么檢測(cè)？

結(jié)節(jié)性硬化癥(TSC)的遺傳檢測(cè)主要通過對(duì)病因基因TSC1和TSC2進(jìn)行突變分析來完成。

常用的檢測(cè)方法包括:

1. PCR+直接測(cè)序法:通過PCR擴(kuò)增TSC1和TSC2基因的編碼區(qū)域,然后進(jìn)行直接測(cè)序,可以檢測(cè)到序列層面的突變,如堿基置換、小的插入/缺失等。這是TSC突變檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。

2. MLPA技術(shù):可以檢測(cè)TSC1和TSC2基因的較大片段插入/缺失,這些突變直接測(cè)序難以檢出。

3. 陣列CGH技術(shù):可以檢測(cè)TSC1和TSC2基因的拷貝數(shù)變異,如雜合/同源缺失等。

4. NGS測(cè)序:通過目標(biāo)區(qū)域捕獲和高通量測(cè)序,可以檢測(cè)TSC1/TSC2的所有類型突變。 <

臨床上建議對(duì)TSC高度臨床可疑患者進(jìn)行TSC1/TSC2基因檢測(cè),特別是對(duì)于無法確診的嬰兒患者。確診TSC有助于評(píng)估預(yù)后,指導(dǎo)隨訪和治療。

如何準(zhǔn)備結(jié)節(jié)性硬化癥基因突變檢測(cè)？

準(zhǔn)備結(jié)節(jié)性硬化癥(TSC)基因突變檢測(cè)的注意事項(xiàng):

1. 樣本要求:外周血標(biāo)本2-5ml,EDTA抗凝,提取基因組DNA。也可以使用口腔拭子、組織標(biāo)本等。

2. 確定檢測(cè)基因:TSC主要由TSC1和TSC2兩個(gè)基因致病,建議默認(rèn)對(duì)兩基因同時(shí)檢測(cè)。

3. 約談遺傳醫(yī)生:了解檢測(cè)目的、過程、結(jié)果解釋等信息,簽署知情同意書。

4. 提供臨床資料:提供詳細(xì)的病史、臨床表型等信息,有助于結(jié)果分析。

5. 選擇檢測(cè)方法:PCR+直接測(cè)序法可檢測(cè)主要突變類型;若負(fù)結(jié)果,可考慮繼續(xù)擴(kuò)大檢測(cè)范圍。

6. 結(jié)果解讀:陽性結(jié)果可明確診斷;陰性結(jié)果不能有效排除,需綜合評(píng)估。

7. 家系調(diào)查:如發(fā)現(xiàn)病因突變,建議對(duì)患者父母進(jìn)行驗(yàn)證,以確定遺傳方式。

8. 婚前/孕前檢測(cè):TSC患者或攜帶者要求進(jìn)行婚前或孕前基因檢測(cè),避免生育受累后代。

請(qǐng)向基因解碼師諮詢,準(zhǔn)備充分,有助于完成檢測(cè)及結(jié)果利用。
 

mTOR抑制劑在結(jié)節(jié)性硬化癥患者中的使用實(shí)用指南

mTOR抑制劑西羅莫司和埃韋羅利穆斯的使用已成為結(jié)節(jié)性硬化癥相關(guān)腫瘤治療的重要手段。先進(jìn)種特異于結(jié)節(jié)性硬化癥的mTOR抑制劑監(jiān)管批準(zhǔn)發(fā)生在2010年,當(dāng)時(shí)美國(guó)FDA批準(zhǔn)埃韋羅利穆斯用于治療腦室下巨細(xì)胞星形細(xì)胞瘤。如今,埃韋羅利穆斯已在全球許多國(guó)家獲批,用于治療與結(jié)節(jié)性硬化癥相關(guān)的腎血管平滑肌脂肪瘤、癲癇發(fā)作等,此外還可用于腦室下巨細(xì)胞星形細(xì)胞瘤。西羅莫司于2014年首先在日本獲批用于治療與結(jié)節(jié)性硬化癥相關(guān)的淋巴管平滑肌瘤,一年后在美國(guó)獲批。

當(dāng)啟動(dòng)mTOR抑制劑治療時(shí),基線實(shí)驗(yàn)室檢查應(yīng)包括禁食血脂檢查、全面代謝檢查、胱抑素C定量、尿液分析和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。這些檢查應(yīng)在治療開始后重新進(jìn)行,此外還需監(jiān)測(cè)mTOR抑制劑谷濃度和合并用藥的水平,尤其是強(qiáng)效酶抑制劑或誘導(dǎo)劑(如一些抗癲癇藥物卡馬西平和奧卡西平會(huì)降低mTOR抑制劑谷濃度,而一些抗菌藥如克拉霉素和酮康唑會(huì)升高mTOR抑制劑谷濃度)。大麻二酚也可升高mTOR抑制劑谷濃度。治療期間應(yīng)定期復(fù)查實(shí)驗(yàn)室檢查,特別是在引入強(qiáng)效酶抑制劑或誘導(dǎo)劑時(shí)?？傮w而言,mTOR抑制劑的全身不良反應(yīng)輕至中度,包括小齡兒童。但是,當(dāng)處方這些藥物時(shí),口腔潰瘍、高脂血癥和高血糖等不良反應(yīng)導(dǎo)致劑量減少或暫停治療并不罕見。在mTOR抑制劑治療期間接受大型手術(shù)的個(gè)體應(yīng)被告知潛在的傷口愈合延緩和罕見情況下可激發(fā)感染的免疫抑制作用,或?qū)钜呙缑庖叩陌踩援a(chǎn)生影響(常見的活疫苗包括用于預(yù)防麻疹、腮腺炎、風(fēng)疹、水痘和黃熱病的疫苗)。mTOR抑制劑治療也與月經(jīng)周期紊亂和卵巢囊腫相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)做法是在計(jì)劃手術(shù)、活疫苗接種或任何延長(zhǎng)/新發(fā)明顯感染或其他不良反應(yīng)前1-2周暫停mTOR抑制劑治療,然后在康復(fù)后恢復(fù)治療(疫苗接種后通常1-2周,手術(shù)后2-4周)。反復(fù)或嚴(yán)重不良反應(yīng)也可能需要在恢復(fù)治療時(shí)降低mTOR抑制劑劑量。需注意,即使血藥谷濃度處于較低端或低于推薦參考范圍(5-15 ng/mL),治療效果仍然存在。